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生长特性: |
贴壁生长 |
形态特征 |
上皮细胞样 |
培养条件: |
培养基:DMEM高糖+10%FBS气相:空气 95%,二氧化碳 5% 温度:37℃ |
简介: |
1983年由谷淑燕、孔繁裔等建系;源自人鼻咽低分化鳞癌组织;原代细胞胰蛋白酶消化,48小时开始生长,首次传代20天。裸鼠体内移植100%成瘤。 Problematic cell line: Contaminated. On the basis of the STR profile (PubMed=18196576) it is identical to CNE-1 and seems to be a hybrid of Hela and of cell line of unknow origin. Originally thought to originate from a nasopharyngeal carcinoma from a male patient. |
培养: |
1. 用 75%酒精喷洒整个瓶消毒,将其平躺置于培养箱中进行 2-3 小时的缓冲,.然后置于无菌操作台,打开瓶口,将其中的培养液去掉, 再往其中加入 5-6mL 新鲜培养基并置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代; 2. 待细胞长满瓶底面积 80%-90%,需要对其进行传代,第一次传代比例为1:2。 3 传代步骤:将 0.25%含 EDTA 胰酶置于 37°预热,倒掉培养瓶中的培养基,往培养瓶中加入 1mlPBS,轻晃洗涤后弃去。往瓶中加 1ml 预热好的胰酶,置于 37°孵育消化(第一次消化需时常取出置于显微镜下观察,以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间,记录最佳消化时间,以便于下次消化),消化好后加入 1ml 完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞, 使之完全脱落,然后收集细胞悬液,1200rpm 离心 3min,弃上清, 加入完全培养基重悬细胞,进行传代。 |
细胞总数: |
1~3*106 |
传代周期: |
2-3 天 |
传代比例: |
1:2~1:4 |
换液频率: |
2-3 天 |
冻存液: |
90%FBS+10%DMSO |
STR: |
Amelogenin:X;CSF1PO:10,11;D13S317:10,12,13.3;D16S539:9,10,11;D18S51:13;D19S433:13;D21S11:27,30;D2S1338:17,23;D3S1358:15,18;D5S818:11,12;D7S820:10,12;D8S1179:12,17;FGA:18,21;TH01:7,9;TPOX:8,12;vWA:14,16; |
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