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生长特性: |
悬浮生长,聚团,少数贴壁 |
形态特征 |
上皮细胞样 |
培养条件: |
培养基:RPMI1640+10%FBS气相:空气 95%,二氧化碳 5% 温度:37℃ |
简介: |
从一位经5-氟尿嘧啶治疗的患者腹水中得到的细胞建立了这个细胞株。 与其它结直肠癌细胞系不同,这株细胞有多巴脱羧酶,细胞质中有核心致密的内分泌型颗粒。 这株细胞不表达TAG-72 或CA19-9抗原,也不生成癌胚抗原(CEA) |
培养: |
1. 用75%酒精喷洒整个瓶消毒,将其平躺置于培养箱中进行 2-3 小时的缓冲,.然后置于无菌操作台,打开瓶口,将其中的培养液去掉, 再往其中加入 5-6mL 新鲜培养基并置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代; 2. 待细胞长满瓶底面积 80%-90%,需要对其进行传代,第一次传代比例为1:2。 3 传代步骤:将 0.25%含 EDTA 胰酶置于 37°预热,倒掉培养瓶中的培养基,往培养瓶中加入 1mlPBS,轻晃洗涤后弃去。往瓶中加 1ml 预热好的胰酶,置于 37°孵育消化(第一次消化需时常取出置于显微镜下观察,以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间,记录最佳消化时间,以便于下次消化),消化好后加入 1ml 完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞, 使之完全脱落,然后收集细胞悬液,1200rpm 离心 3min,弃上清, 加入完全培养基重悬细胞,进行传代。 |
细胞总数: |
1~3*106 |
传代周期: |
2-3 天 |
传代方法: |
1:3~1:6传代,每周换液2~3次 |
传代比例: |
1:2~1:4 |
换液频率: |
2-3 天 |
冻存液: |
90%FBS+10%DMSO |
STR: |
Amelogenin:X;CSF1PO:11;D13S317:8,11;D16S539:11,12;D18S51:15,16;D19S433:15,18.2;D21S11:32.2;D2S1338:14,16;D3S1358:D5S818:11.1;D7S820:10,11;D8S1179:12.2,14,15;FGA:20,22;TH01:6,9.3;TPOX:8,11;vWA:16; |
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