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生长特性: |
贴壁生长 |
形态特征 |
上皮样 |
培养条件: |
培养基:DMEM(高糖)+10%FBS气相:空气 95%,二氧化碳 5% 温度:37℃ |
简介: |
LS 174T是LS 180 (ATCC CL 187)结肠腺癌细胞株的胰蛋白酶化变种。 它比亲本更易传代,象LS 180一样生成大量的癌胚抗原(CEA)。 电镜研究表明有丰富的微丝和细胞质粘液素液泡。 直肠抗原3阳性。 p53抗原表达阴性,但mRNA表达阳性。 与ATCC CL-187来源于同一个肿瘤。LS 174T细胞角蛋白染色阳性。 癌基因c-myc, N-myc, H-ras, N-ras, Myb, 和 fos的表达呈阳性。 癌基因k-ras和sis的表达未做检测。 |
培养: |
1. 用75%酒精喷洒整个瓶消毒,将其平躺置于培养箱中进行 2-3 小时的缓冲,.然后置于无菌操作台,打开瓶口,将其中的培养液去掉, 再往其中加入 5-6mL 新鲜培养基并置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代; 2. 待细胞长满瓶底面积 80%-90%,需要对其进行传代,第一次传代比例为1:2。 3 传代步骤:将 0.25%含 EDTA 胰酶置于 37°预热,倒掉培养瓶中的培养基,往培养瓶中加入 1mlPBS,轻晃洗涤后弃去。往瓶中加 1ml 预热好的胰酶,置于 37°孵育消化(第一次消化需时常取出置于显微镜下观察,以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间,记录最佳消化时间,以便于下次消化),消化好后加入 1ml 完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞, 使之完全脱落,然后收集细胞悬液,1200rpm 离心 3min,弃上清, 加入完全培养基重悬细胞,进行传代。 |
细胞总数: |
1~3*106 |
传代周期: |
2-3 天 |
传代方法: |
1:3~1:6传代,每周换液2~3次 |
传代比例: |
1:2~1:4 |
换液频率: |
2-3 天 |
冻存液: |
90%FBS+10%DMSO |
STR: |
Amelogenin:X;CSF1PO:10,14;D13S317:10;D16S539:11,13;D18S51:11,13;D19S433:14,15;D21S11:29,31;D2S1338:18,22;D3S1358:15,17;D5S818:11,15;D7S820:OL,11;D8S1179:12,16;FGA:21,22;TH01:6,7;TPOX:8,9;vWA:15,17; |
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