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生长特性：

贴壁生长

形态特征

上皮样

培养条件：

培养基：MEM+10%FBS气相：空气 95%，二氧化碳 5%

温度：37℃

简介：

该细胞系由AaronsonS建立，源自一位52岁患有肾癌的女性病人。

培养：

1. 用 75%酒精喷洒整个瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行 2-3 小时的缓冲，.然后置于无菌操作台，打开瓶口，将其中的培养液去掉， 再往其中加入 5-6mL 新鲜培养基并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代；

2. 待细胞长满瓶底面积 80%-90%，需要对其进行传代，第一次传代比例为1:2。

3 传代步骤：将 0.25%含 EDTA 胰酶置于 37°预热，倒掉培养瓶中的培养基，往培养瓶中加入 1mlPBS，轻晃洗涤后弃去。往瓶中加 1ml 预热好的胰酶，置于 37°孵育消化（第一次消化需时常取出置于显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间，记录最佳消化时间，以便于下次消化），消化好后加入 1ml 完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞， 使之完全脱落，然后收集细胞悬液，1200rpm 离心 3min，弃上清， 加入完全培养基重悬细胞，进行传代。

细胞总数：

1~3*106

传代周期：

2-3 天

传代比例：

1:2~1:4

换液频率：

2-3 天

冻存液：

90%FBS+10%DMSO