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生长特性: |
贴壁生长 |
形态特征 |
上皮样细胞 |
培养条件: |
培养基:DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS 气相:空气 95%,二氧化碳 5% 温度:37℃ |
简介: |
该细胞1982年由J. Gioanni建系,源自一位56岁白人男性的舌头中倍的病变部位,角蛋白强阳性 |
培养: |
1. 用 75%酒精喷洒整个瓶消毒,将其平躺置于培养箱中进行 2-3 小时的缓冲,.然后置于无菌操作台,打开瓶口,将其中的培养液去掉, 再往其中加入 5-6mL 新鲜培养基并置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代; 2. 待细胞长满瓶底面积 80%-90%,需要对其进行传代,第一次传代比例为 1:2。 3 传代步骤:将 0.25%含 EDTA 胰酶置于 37°预热,倒掉培养瓶中的培养基,往培养瓶中加入 1mlPBS,轻晃洗涤后弃去。往瓶中加 1ml 预热好的胰酶,置于 37°孵育消化(第一次消化需时常取出置于显微镜下观察,以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间,记录最佳消化时间,以便于下次消化),消化好后加入 1ml 完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞, 使之完全脱落,然后收集细胞悬液,1200rpm 离心 3min,弃上清, 加入完全培养基重悬细胞,进行传代。 |
细胞总数: |
1~3*106 |
传代周期: |
2-3 天 |
传代比例: |
1:2~1:4 |
换液频率: |
2-3 天 |
冻存液: |
90%FBS+10%DMSO |
STR |
Amelogenin:X;CSF1PO:9,10;D13S317:12,13.3;D16S539:9,10;D18S51:16;D19S433:13,14;D21S11:27,28;D2S1338:17;D3S1358:15,18;D5S818:11,12;D7S820:8,12;D8S1179:12,13;FGA:21;TH01:7;TPOX:8,12;vWA:16,18; |
1 收到细胞后首先观察 T-25 瓶是否有损坏、漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2 瓶中运输的培养液不能重复使用,请换新鲜培养液培养
3 对于贴壁细胞,若大部分细胞漂浮,置于培养箱隔夜观察,大部分漂浮细胞重新贴壁,表 明细胞活力正常,继续培养,剩余漂浮的细胞可以去掉;若大部分细胞仍然不贴壁,将漂浮 的细胞离心收集,用台盼蓝染色鉴定细胞活力,并与本公司销售人员及时联系。
4 建议客户收到细胞后不同倍镜各拍几张细胞的照片,记录细胞状态,如细胞状态出现问题 请于 72h 内与本公司销售联系,以便于更好的帮您解决问题,超过时间我段,本公司则默认细胞状态良好,不免费对后续细胞状态问题进行售后。
5 因细胞产品的特殊性,如客户对本公司细胞质量存有疑问,请于收到细胞后 1 月内与本公司销售联系,超过时间段,本公司则默认细胞质量优良,不承担因细胞产生的任何责任。
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