产品信息
CD8+ T 细胞(CD8+ T Cells)
PB02
冻存株 1 管,2 X 10
6
cells/管
阴选
产品描述
使用非接触的免疫磁珠标记单个核细胞,从中分离获得 CD8+ T 细胞。
本产品经过细胞数量、细胞纯度、细胞活力、细菌和真菌检测,提供细胞流式鉴定图和完整的
质量检测报告,保证产品质量。
产品保存
收到产品后,检测产品是否有破损及是否处于冻存状态。若处于冻存状态,立即放置于-80℃
的深低温冰箱(<1 个月)或液氮(>1 个月)中保存;若出现问题,请及时拍照记录并向厂
家反馈情况再进行废弃。
收到产品后,请按要求放置至少 3d 后再进行复苏操作,以保证产品的稳定性和细胞活率。
注意事项
★ 在无菌条件下处理本产品;
★ 储存于液氮中的冻存管有爆管的可能,请仔细阅读说明书中的复苏流程;
★ 本产品仅限科研使用,请勿用于医药、临床诊断或治疗;
★ 请按照受污染的生物标本原则来处理本产品,以保证产品的安全性。
培养条件
完全培养基:IMDM/DMEM/RPMI-1640+10%灭活的 FBS
产品复苏
1. 开启水浴锅至 37℃, 提前预热完全培养基。
2. 从液氮中取出细胞,用 70%酒精棉球擦拭冻存管表面,随后在生物安全柜中适度拧松管盖,平衡
气压后,再拧紧。
3. 在 37℃水浴锅中快速解冻细胞,不停晃动并查看,当冻存管中只剩少量冰晶时即可停止。
a) 尽可能避免水没过冻存管帽,建议用镊子夹住冻存管连续晃动,以降低污染的风险。
b) 2min 内务必完成细胞复苏过程,时间过久会导致复苏细胞活率较差。
4. 待细胞冻存液完全解冻,用 70%酒精棉擦拭冻存管的外壁后拿入生物安全柜,开盖后吹匀细胞悬
液,取 10μL 用于细胞计数。计数方法:按照 1:1 与台盼蓝混合后使用血球计数板计数,或按照
计数仪使用说明进行计数,记录细胞活力和细胞密度。
5. 将剩余细胞悬液转移至 50mL 离心管中,并用 1mL 完全培养基润洗冻存管,收集残留的细胞。
6. 缓慢滴加 15-20mL 完全培养基至高浓度细胞悬液中(约 1mL/秒),同时晃动离心管,完全混匀
后在室温下离心 300g、15min。
7. 离心后转移上清到新的离心管中,暂时不要丢弃,以免细胞未完全收集而造成较大损失。
8. 按需加入新鲜的完全培养基重悬细胞,并再次计数,用于后续实验。
若需再次洗涤细胞,则重复步骤 6-8,每次洗涤会造成 10-15%的细胞损失。
若离心后细胞数量低于预期,请将步骤 7 的上清液离心 500g、15min,再次收集。
使用过程中有任何问题请及时与我们联系!